Уже через год после первого введения маркерного гена в организм человека была проведена успешная клеточная соматическая генотерапия наследственного заболевания, обусловленного дефицитом аденозинде-заминазы (ADA) . При этом заболевании в крови пациентов накапливается в высокой концентрации 2'-дезоксиаденозин, оказывающий токсическое действие на Т- и В- лимфоциты, в результате чего у больных развивается серьезный комбинированный иммунодефицит. Для поддержания жизни пациентов проводят периодические гетерологичные трансплантации клеток костного мозга, однако лишь для трети больных могут быть подобраны совместимые доноры. Энзим-замещающая терапия также приводит к заметному улучшению состояния пациентов, но, как правило, успех этот носит временный характер. План генной терапии, разработанный сотрудниками Национального института здоровья США (N1H) и одобренный RAC, заключался в назначении больным ау-тологичных лимфоцитов, трансдуцированных нормальным ADA-геном. Осуществление этого плана потребовало выполнения следующих процедур: изоляции клеток из крови пациента; активации и иммуностиму-ляции роста Т-лимфоцитов в культуре; трансдукции их ретровирусным вектором, несущим нормальный ADA-ген и маркерный ген пео; отбора трансдуцированных клеток на селективной среде; внутривенной реин-фузии модифицированных Т-лимфоцитов пациенту. Первой пациенткой, подвергшейся этой терапии, была 4-х летняя девочка (см. раздел 9.1). На протяжении 10,5 мес ей было сделано 8 аутологичных вливаний трансдуцированных Т-лимфоцитов, и после полугодового перерыва программу реинфузий повторяли каждые 3-5 мес. Уже после первого цикла число Т-лимфоцитов нормализовалось, концентрация ADA в циркулирующих клетках крови увеличилась с 1 до 20 - 25% нормального уровня, и резко улучшились основные иммунные характеристики. Вопреки многим прогнозам, на протяжении более чем 6 мес после прекращения массированных вливаний в кровотоке пациентки устойчиво сохранялось высокое число корректированных Т-клеток, что позволило в дальнейшем снизить количество вводимых клеток и значительно увеличить промежутки между этими процедурами. Спустя 3 мес после первых клинических испытаний была начата программа генной терапии ADA-дефицита у второй 9-летней пациентки. После 11 инфузий трансдуцированных аутологичных Т-клеток состояние этой девочки также заметно улучшилось, и отмечалась полная нормализация соответствующих биохимических и иммунологических показателей. Таким образом, необходимо еще раз отметить, что при лечении обеих пациенток был достигнут очевидный клинический эффект [Anderson W.F., 1992; Culver К. W., 1994].
Однако в обоих случаях не все иммунные функции восстанавливались полностью. По-видимому, это было связано с тем, что коррекция генетического дефекта проводилась в зрелых Т-лимфоцитах. В связи с этим предложены программы генной терапии с помощью реинфузии смешанной популяции трансдуцированных Т-лимфоцитов и периферических стволовых клеток крови. Возможность изоляции и трансдукции таких тотипотентных стволовых клеток показана в экспериментах на приматах.
