Подробный анализ используемых при этом подходов и результаты первых клинических испытаний выходят за рамки нашего изложения. Однако материал этот настолько интересный и многообещающий, что мы позволим себе на нескольких примерах охарактеризовать основные принципы построения таких генотерапевтических программ.
Как упоминалось ранее перенос гена в организм человека был осуществлен в 1989 г. в большей степени в исследовательских, а не в терапевтических целях. Это был маркерный прокариотический ген пео, сообщающий клеткам устойчивость к неомицину. Он был введен пациенту, страдающему злокачественной меланомой, в составе трансду-цированных TIL-клеток (Т-лтгмфоцитов, полученных из опухолевых тканей больного). В 1986 г. вскоре после идентификации этого нового класса иммунных клеток была предпринята попытка лечения меланомы путем аутологичной внутривенной инфузии TIL-клеток, предварительно выделенных из опухолей пациентов и интенсивно наращиваемых in vitro в присутствии ростового фактора IL-2. Примерно у трети пациентов лечение оказалось эффективным, хотя в последующем наблюдали значительное число рецидивов заболевания. Для анализа причин терапевтического эффекта TIL-клеток и совершенствования методики лечения меланомы необходимо было исследовать устойчивость вводимых Т-лимфоцитов и их миграцию в организме больного. С этой целью была произведена маркировка используемых для лечения TIL-клеток путем их трансдукции в культуре ретровирусным вектором, несущим ген пео, с последующим отбором неомицин-устойчивых клонов и выращиванием их на среде G418. Результаты исследований показали, что реинфузиро-ванные 0418-устойчивые TIL-клетки действительно проникают в опухоль и могут быть обнаружены там в небольшом количестве даже спустя 9 недель после введения. Найдены отличия субпопуляции Т-лимфоцитов в опухоли от общей популяции инфузированных TIL-клеток.
